Diagnosis PCR tuberkulosis

Tuberkulosis adalah infeksi spesifik, fokusnya mungkin di jaringan manusia selama bertahun-tahun, dan kemudian menyebar selama beberapa bulan. Ini adalah penyakit kronis yang rejimen pengobatannya yang optimal sulit ditemukan. Salah satu alasan untuk ini adalah diagnosis terlambat, ketika mycobacteria, sementara di tubuh manusia, sudah beradaptasi dengan banyak obat.

Metode diagnosis modern apa yang ada? Diagnostik PCR - apakah itu? Bagaimana penelitian ini dilakukan? Dalam kasus apa tuberkulosis didiagnosis dengan metode ini dan apa esensinya?

Apa itu diagnosis PCR

Ini adalah salah satu metode paling modern untuk mendiagnosis bukan hanya penyakit, tetapi juga mendeteksi bahan biologis. Diagnostik PCR ditemukan baru-baru ini. Sekitar 30 tahun yang lalu pada tahun 1983, seorang ahli biokimia Amerika, Carey Banks Mullis, mengusulkan skema pemulihan yang kompleks untuk bahan biologis mikroorganisme dalam satu segmen pendek. Berkat penemuannya, ilmuwan dianugerahi penghargaan tertinggi - Hadiah Nobel.

Apa itu - PCR diagnosis infeksi? Polymerase chain reaction (PCR) adalah diagnosis deteksi penyakit virus, berdasarkan metode rekayasa genetika. Ini secara luas digunakan dalam mikrobiologi medis, imunologi dan virologi. Metode ini universal dan membantu membuat diagnosis dengan sejumlah kecil bahan. Identifikasi infeksi dapat secara harfiah pada jam pertama infeksi, jauh sebelum gejala pertama penyakit muncul.

Metode ini terdiri dalam memperoleh dari bahan dari orang sakit bukan patogen itu sendiri, tetapi fragmen dari genom (partikel DNA), biosintesisnya dengan tekad berikutnya yang kelas mikroorganisme materi genetik yang diperoleh milik dengan cara metode genetik molekuler.

Terlepas dari kenyataan bahwa ini adalah proses yang kompleks, dibutuhkan lebih sedikit waktu daripada banyak metode biologis untuk mendeteksi agen infeksi. Hanya dalam beberapa jam, mikroorganisme dapat dideteksi oleh PCR. Untuk melakukan ini, tidak perlu mengisolasinya dari lingkungan (darah, cairan serebrospinal, sputum) dan menumbuhkannya untuk waktu lama pada media nutrisi buatan. Cukup bahwa sebagian kecil dari untai DNA dari agen infeksius hadir dalam materi yang diteliti.

Dasar dari reaksi adalah kemungkinan dalam kondisi buatan (in vitro) untuk menciptakan sintesis molekul asam nukleat dari agen infeksi.

Apa yang dibutuhkan untuk PCR?

  1. Primer adalah segmen DNA dari mana biosintesis atau penciptaan dimulai.
  2. Nukleotida atau senyawa kompleks yang merupakan dasar dari molekul DNA atau RNA.
  3. Reaksi rantai polimerase tidak mungkin tanpa kehadiran polimerase, yang merupakan enzim mempercepat PCR.

Tahapan diagnostik PCR

Bagaimana diagnosis molekuler dilakukan oleh PCR? Prosedurnya sederhana dan membutuhkan waktu yang singkat, dengan mempertimbangkan pengumpulan materi.

  1. Sebelum memulai penelitian, ambil bahan biologis yang diperlukan - ini adalah air pencuci tenggorokan, darah, isi lambung, dan dahak. Jenis bahan biologis tergantung pada patogen yang dicurigai.
  2. Denaturasi atau perusakan struktur primer DNA, yang terdiri dari dua rantai. Inti dari tahap ini adalah untuk memisahkan dua sirkuit di bawah pengaruh suhu tinggi (maksimum adalah 98 ºC, yang berlangsung tidak lebih dari dua menit).
  3. Pada tahap selanjutnya dari PCR, yang disebut annealing, suhu dikurangi dengan beberapa derajat sehingga primer akan mengikat untai DNA.
  4. Elongasi, di mana sintesis molekul yang diinginkan terjadi secara langsung.

Akibatnya, hanya 25-30 siklus seperti itu yang menerima jumlah salinan DNA mikroorganisme yang diperlukan, yang mudah dikenali.

Apakah PCR memerlukan diagnosis tuberkulosis?

Tidak mungkin bagi semua orang yang dicurigai tuberkulosis untuk melakukan PCR, karena metode ini membutuhkan peralatan yang mahal. Tidak semua klinik umum mampu membelinya. Selain itu, begitu kebetulan bahwa metode biasa untuk mendiagnosis infeksi pada kebanyakan kasus juga membenarkan diri mereka sendiri.

Ini termasuk:

  • survei pasien, pengambilan riwayat;
  • pemeriksaan penuh orang tersebut;
  • penelitian menggunakan uji Mantoux tuberkulin;
  • X-ray atau fluorografi
  • diagnosa komputer jika perlu;
  • metode penelitian mikrobiologi: smear microscopy dan pemeriksaan bakteriologis sputum.

PCR untuk tuberkulosis dilakukan dalam kasus-kasus khusus ketika sulit untuk membuat diagnosis atau tidak mungkin untuk melaksanakan metode instrumental lainnya.

Meskipun metode diagnostik melimpah, kejadian tuberkulosis terus tumbuh. Saat ini, tidak hanya pertumbuhannya, tetapi juga fitur lainnya:

  • penyakit ini sering terjadi dalam bentuk parah;
  • jumlah kasus yang fatal meningkat;
  • semakin kebal terhadap obat kemoterapi modern yang didiagnosis.

Keengganan orang-orang itu sendiri untuk menjalani pemeriksaan medis rutin setiap tahun, penolakan vaksinasi mengarah pada penyebaran tuberkulosis. Dalam kondisi seperti itu, diperlukan metode penelitian yang cepat, informatif dan efektif, yang harus dapat diakses oleh anak-anak dan orang dewasa. Semua metode diagnostik di atas jauh lebih rendah daripada PCR.

Manfaat mendiagnosis tuberkulosis dengan PCR

Penelitian ini, meskipun baru, telah terbukti dengan baik, terutama dalam kasus-kasus kontroversial di mana tidak mungkin untuk membuat diagnosis karena sejumlah alasan.

Berkat PCR, jauh lebih mudah untuk mendeteksi agen penyebab tuberkulosis dalam bahan uji.

Keuntungan diagnostik PCR adalah sebagai berikut.

  1. Ini adalah analisis cepat. Sebuah fragmen kecil dari molekul DNA dapat digunakan untuk mendiagnosis hanya dalam beberapa jam (sekitar lima), yang berhasil digunakan dalam situasi darurat ketika, misalnya, sebelum operasi diperlukan untuk menentukan apakah seseorang sakit dengan tuberkulosis.
  2. Analisis PCR diperbolehkan dalam kasus ketika metode lain tidak tersedia atau dilarang (untuk mendeteksi tuberkulosis paru, kadang-kadang perlu untuk mengambil beberapa gambar radiografi, yang akan membuat dosis radiasi yang besar).
  3. Dengan bantuan PCR, setiap lingkungan biologis diperiksa untuk kehadiran patogen di dalamnya. Misalnya, Anda dapat melakukan studi cairan serebrospinal, jika ada kecurigaan meningitis TB.
  4. Menerapkan diagnosis PCR penyakit menular pada anak-anak, karena metode ini aman.
  5. Memungkinkan Anda mengidentifikasi patogen pada setiap tahap penyakit.
  6. Sensitivitas tinggi PCR memungkinkan untuk mendeteksi Mycobacterium tuberculosis, bahkan jika hanya ada beberapa mikroorganisme dalam bahan biologis.
  7. Adalah baik untuk melaksanakan diagnosis kekambuhan penyakit.

Setelah semua membaca PCR tampaknya metode diagnostik hampir sempurna, yang harus dilakukan untuk semua orang dengan kecurigaan tuberkulosis. Tetapi ada juga kerugian di sini, mereka harus dipertimbangkan.

Kekurangan PCR dalam diagnosis tuberkulosis

Di zaman kita, diagnostik seperti itu lebih jarang daripada keteraturan. Dan untuk ini ada alasannya.

  1. Ini adalah metode penelitian yang mahal. Di banyak klinik, peralatan untuk PCR tidak ada karena biaya tinggi, tetapi analisis masih dapat dilakukan di laboratorium berbayar.
  2. Segera setelah perawatan, mycobacteria mati atau hidup dalam jumlah kecil mungkin masih ada di tubuh manusia (hasilnya akan positif selama diagnostik PCR), sehingga metode ini tidak akurat pada saat ini, tidak masuk akal untuk melaksanakannya.
  3. Mutasi mikobakteria menghasilkan PCR yang tidak efektif - urutan DNA untai normal tidak dapat disintesis.
  4. Perlu untuk memilih lingkungan yang tepat untuk penelitian, darah diambil hanya jika dicurigai terinfeksi (sepsis), tidak perlu mengambil dahak jika ada pertanyaan tuberkulosis pada organ sistem saraf. Dalam hal ini, PCR tidak akan dapat mendeteksi patogen dan diagnosis akan menjadi tidak informatif.

Indikasi untuk mendeteksi tuberkulosis menggunakan analisis PCR

Diagnostik PCR tuberkulosis paling sering dilakukan dalam kasus-kasus kontroversial. Kapan dokter merujuk penelitian ini?

  1. Jika sulit untuk membuat diagnosis menggunakan metode yang biasa tersedia, tetapi ada kontak dengan pasien dengan tuberkulosis.
  2. Dalam kasus ketika tidak mungkin untuk membawa seseorang ke poliklinik untuk pemeriksaan rutin rutin untuk tuberkulosis, lebih mudah untuk memeriksanya menggunakan PCR, karena dahak untuk pemeriksaan dapat disampaikan dalam botol dan diagnosis dikonfirmasi dalam beberapa jam.
  3. Jika seseorang akan menjalani operasi darurat dan sangat mendesak untuk mengetahui apakah dia sakit dengan tuberkulosis.
  4. Jika perlu, wanita hamil juga lebih baik untuk skrining tuberkulosis menggunakan PCR, karena metode ini aman.
  5. Atas dasar bayaran, siapa saja yang belum mengkonfirmasi tuberkulosis dengan metode bakteriologis dan fluoroskopi dapat menjalani diagnosis. Hal ini terjadi ketika lesi di paru-paru tidak terlihat dalam gambar langsung, dan orang selama pengiriman dahak untuk penelitian tidak dapat mengikuti rekomendasi untuk pengumpulan materi yang benar. Dalam hal ini, seseorang khawatir tentang semua gejala karakteristik tuberkulosis paru.
  6. Ketika ada keraguan tentang hasil tes Mantoux.
  7. Lebih baik untuk melakukan diagnosis PCR tuberkulosis pada anak-anak. Prosedur ini aman, tidak menciptakan paparan radiasi tambahan, dan efektif dalam mendeteksi sulit untuk mendiagnosis bentuk penyakit.

Diagnosis tuberkulosis tepat waktu adalah kunci untuk pengobatan yang diresepkan dengan benar dan mengurangi penyebaran penyakit. Seringkali, metode deteksi penyakit yang akrab tidak selalu efektif. Oleh karena itu, PCR saat ini adalah salah satu cara yang paling andal dan aman untuk mendeteksi infeksi pada tahap awal perkembangannya.

Ada kontraindikasi untuk tes Mantoux? Analisis PCR untuk tuberkulosis akan dilakukan.

Tuberkulosis adalah penyakit berbahaya yang dapat berhasil diobati dengan diagnosis tepat waktu.

Salah satu studi yang paling informatif untuk mengidentifikasi penyakit pada tahap awal disebut metode PCR (polymerase chain reaction).

Analisis PCR bukan hanya yang paling informatif, tetapi juga salah satu studi yang paling mudah diakses yang dapat mendeteksi tuberkulosis pada tahap awal.

Apa itu analisis PCR?

Semua mikroorganisme hidup, termasuk virus dan bakteri, mengandung molekul RNA dan DNA dalam strukturnya. Dengan menyoroti asam-asam ini, adalah mungkin untuk mengatakan dengan sangat pasti agen asing mana yang ada dalam darah manusia dan membuat diagnosis yang akurat.

Inti dari metode PCR adalah pemrosesan khusus dari sampel cairan biologis, sebagai hasil yang memungkinkan untuk menentukan jenis mikroorganisme yang ada di dalamnya.

Analisis PCR untuk tuberkulosis: indikasi, kelebihan dan kekurangan

Teknik PCR digunakan pada orang dengan lesi paru berat pada kasus-kasus tersebut dan manifestasi pernapasan (batuk berat, hemoptisis), ketika tidak mungkin untuk mendiagnosis penyakit secara akurat sesuai dengan gejala klinis.

Disarankan untuk menjalani studi dan setelah kontak langsung dengan pembawa penyakit. Keuntungan yang dimilikinya antara lain:

  • kecepatan eksekusi - untuk mendapatkan hasil, tidak perlu menumbuhkan budaya patogen atau melaksanakan prosedur rumit lainnya;
  • sangat informatif - ketika mendiagnosis tuberkulosis, akurasi analisis mencapai 90% dan lebih tinggi;
  • sensitivitas dan spesifisitas tinggi - untuk mengidentifikasi patogen dalam material mungkin hanya mengandung satu sel virus;
  • universalitas - hampir semua cairan biologis cocok untuk analisis: sputum, darah, lavage bronkial.

Sebagai perbandingan: keakuratan mikrospor sputum smear, yang digunakan untuk mendeteksi tuberkulosis, hanya 40-50%, dan dengan jumlah patogen yang rendah dikurangi menjadi 10% atau kurang. Budaya sputum lebih informatif, tetapi butuh 2 hingga 8 minggu untuk mendapatkan hasil.

Anda dapat menggunakan PCR untuk tuberkulosis daripada Mantoux, jika orang tersebut memiliki kontraindikasi terhadap sampel.

Kelemahan teknik ini termasuk risiko mendapatkan hasil negatif palsu. Dengan kata lain, tidak adanya DNA spesifik dalam dahak, darah atau urin belum menunjukkan tidak adanya tuberkulosis pada pasien.

Itu penting. Dalam diagnosis tuberkulosis pada anak-anak, sensitivitas analisis PCR lebih rendah daripada pada orang dewasa, dan sekitar 25-83%.

Foto 1. Melakukan PCR alih-alih Mantoux pada anak adalah pilihan yang baik jika ia alergi atau sering sakit.

Prosedur untuk analisis PCR

Prosedur untuk analisis PCR dilakukan dengan alat khusus yang disebut amplificator, dan terdiri dari empat tahap. Untuk penelitian ini, bagian DNA diperlukan dari mana sintesis molekul dimulai, nukleotida (basa molekul DNA), serta polimerase, atau enzim yang mempercepat prosedur.

  1. Pengumpulan bahan biologis (dahak, darah, bilas bronkial).
  2. Pemanasan sampel hingga suhu sekitar 98% untuk menghancurkan struktur utama rantai DNA.
  3. Anil, atau menurunkan suhu beberapa derajat untuk mengikat primer ke untai DNA.
  4. Sintesis molekul diperlukan untuk menghasilkan hasil.

Setelah melakukan 25-30 siklus seperti itu, sejumlah salinan DNA virus terbentuk, dari situ mudah untuk menentukan agen penyebab penyakit.

Perhatian: analisis PCR tidak membedakan antara mikroorganisme "mati" dan "hidup", oleh karena itu hasilnya bisa positif untuk waktu tertentu setelah perawatan.

Persiapan untuk analisis

Jika tes darah PCR diambil untuk tuberkulosis, maka tidak diperlukan pelatihan khusus, tetapi pasien disarankan untuk mengikuti aturan umum: tidak makan setidaknya 8 jam, tidak termasuk alkohol dan minum obat, tidak merokok selama satu jam sebelum mengambil bahan.

Sputum dikumpulkan di pagi hari setelah menyikat dan membilas mulut secara menyeluruh.

Jika eksudat diekskresikan dengan buruk, ekspektoran harus diambil malam sebelumnya atau dihirup. Dahak dengan lendir, nanah, bercak putih atau kekuningan memiliki nilai diagnostik.

Jika tidak mungkin untuk mengambil dahak untuk analisis, penyeka bronki digunakan untuk mengidentifikasi patogen. Analisis semacam itu tidak memerlukan persiapan, dan materi diambil sebagai berikut. Dengan bantuan jarum suntik laring, pasien dituangkan ke dalam trakea larutan natrium klorida, yang menyebabkan batuk yang kuat - cairan batuk digunakan untuk penelitian.

Perhatian. Hasil analisis mendistorsi antibiotik, heparin dan obat lain yang digunakan untuk pengobatan lokal, sehingga penelitian dianjurkan 10-14 hari setelah pemberian.

Keuntungan dan kerugian PCR (a) untuk diagnosis tuberkulosis

Infeksi tuberkulosis spesifik telah hadir di jaringan dan struktur manusia selama bertahun-tahun, dan dalam keadaan tertentu menyebar dengan cepat ke seluruh tubuh dalam 2-3 bulan. Kadang-kadang sangat sulit untuk memilih pengobatan yang optimal karena diagnosis terlambat dan adaptasi patogen terhadap banyak obat-obatan.

Diagnosis PCR tuberkulosis terbaru membantu mendeteksi tidak hanya penyakit yang sudah berkembang, tetapi juga patogen itu sendiri, ketika tanda-tanda pertama penyakit itu belum muncul.

Apa itu PCR?

Diagnosis tuberkulosis oleh PCR telah muncul baru-baru ini. Pada tahun 1983, seorang ahli mikrobiologi dari Amerika, Cary Mullis, menemukan prosedur di mana mikroorganisme dapat direkonstruksi dari bahan biologis dalam segmen pendek. Karya ini telah meraih Hadiah Nobel.

PCR untuk tuberkulosis adalah proses rantai polimer di mana diagnosis dan deteksi patogen virus oleh rekayasa genetika. Teknik ini digunakan di laboratorium imunologi, mikrobiologi, virologi dan biokimia.

Metode universal membantu dokter mendiagnosis dan mendeteksi proses infeksi bahkan setelah jam pertama infeksi, jauh sebelum timbulnya gejala. Penelitian dimungkinkan bahkan dengan sejumlah kecil biomaterial.

Apa yang dibutuhkan untuk analisis?

  • Beberapa potongan DNA (primer), yang dengannya sintesis biologis dimulai;
  • Senyawa nukleotida, dasar dari molekul DNA atau RNA;
  • Enzim polimerase yang mempercepat analisis PCR.

Apa dasar dari metode ini?

Pertama, segmen DNA diekstrak dari biomaterial dari orang yang terinfeksi, menggunakan metode biosintesis gen-molekul, jenis mikroorganisme yang dimiliki biofragmen lebih lanjut ditentukan.

Reaksi kompleks ini membutuhkan waktu lebih sedikit daripada beberapa biomethods. PCR menentukan patogen dalam beberapa jam, sementara tidak perlu mengisolasinya dari cairan biologis (dahak, serebrospinal atau darah sedang), tidak perlu menumbuhkannya untuk waktu yang lama dalam medium nutrisi. Cukup bahan yang dipelajari mengandung untai DNA dari patogen infeksius.

Ketika melakukan tes darah PCR untuk tuberkulosis in vitro, sintesis asam ribonukleat dari mycobacterium tuberculosis dibuat secara artifisial.

Tahapan diagnosis

Reaksi molekuler oleh PCR adalah prosedur sederhana yang membutuhkan sedikit waktu. Biomaterial yang diperlukan diambil: darah, dahak, cairan pencucian bronkial digunakan untuk menentukan tbc.

  1. Pertama, bentuk utama DNA dihancurkan, 2 rantai dipisahkan pada suhu tinggi (maksimum 98 ° C selama tidak lebih dari 2 menit);
  2. Kemudian anil dilakukan, suhu primer dikurangi oleh beberapa divisi, untai DNA dihubungkan dengan primer;
  3. Tahap selanjutnya disebut elongasi, dengan biosintesis struktur molekul yang diperlukan.

Untuk mendapatkan jumlah salinan DNA yang diperlukan, 25 hingga 30 siklus tersebut harus lulus, dan jumlah mikobakteri yang dihasilkan mudah dikenali.

Apakah perlu untuk melakukan PCR untuk tuberkulosis?

Langsung ke semua pasien dengan dugaan TVC, diagnosis rantai tidak dilakukan, karena prosedur memerlukan penggunaan peralatan yang mahal. Tidak semua lembaga medis negara memungkinkan untuk dibeli, terutama karena metode yang biasa digunakan untuk mendiagnosis mycobacterium tuberculosis juga bersifat informatif.

  • Hati-hati mengambil anamnesis, interogasi pasien;
  • Inspeksi visual;
  • Tes tuberkulin Mantoux;
  • Pemeriksaan radiografi atau fluorografi;
  • Jika perlu, diagnostik komputer;
  • Pemeriksaan mikroskopis atau bakteriologis dari masker dengan dahak.

PCR untuk tuberkulosis hanya dilakukan bila tidak mungkin untuk melakukan analisis instrumen lain atau dalam keadaan yang sulit didiagnosis.

Terlepas dari kenyataan bahwa mereka telah menemukan berbagai macam metode diagnostik, jumlah pasien dengan tuberkulosis terus bertambah. Selain itu, insidensi telah memperoleh beberapa fitur: bentuk parah dari penyakit ini sering diamati, jumlah kematian meningkat, patogen menjadi resisten terhadap obat kemoterapi yang ada.

Banyak orang tidak mau menjalani pemeriksaan rutin setiap tahun, menolak vaksinasi, yang mengarah pada peningkatan insidensi. Keadaan seperti itu membutuhkan metode penelitian yang efektif dan informatif tersedia untuk orang dewasa dan anak-anak yang didiagnosis dengan tbc. PCR memiliki kelebihan dibandingkan metode diagnostik lainnya.

Berapa nilai dari metode ini?

Penelitian terbaru ini telah terbukti dengan baik. Jika untuk sejumlah alasan sulit untuk membuat diagnosis atau dalam beberapa kasus kontroversial, PCR dapat mendeteksi basil tuberkulum lebih mudah dalam bahan biologis daripada metode lain.

  • Studi cepat ini, segmen kecil dari molekul memungkinkan untuk membuat diagnosis yang akurat dalam waktu singkat dalam sekitar 5 jam, ini digunakan dalam kasus-kasus darurat, misalnya, sebelum intervensi bedah mendesak;
  • Tes darah untuk tuberkulosis adalah mungkin ketika metode lain tidak tersedia atau kontraindikasi - kadang-kadang untuk mendeteksi patogen tbc, banyak Rg-shot harus diambil, dosis radiasi yang terlalu besar;
  • Dengan menggunakan reaksi polimerase, setiap cairan biologis dapat diperiksa untuk keberadaan mikobakteria. Misalnya, Anda dapat melakukan studi cairan serebrospinal di meningitis TB atau urin di tuberkulosis urogenital;
  • Metode ini aman, diagnosis tuberkulosis pada anak-anak yang menggunakan PCR tidak menimbulkan kesulitan;
  • Metode reaksi polimer mengungkapkan tubercle bacillus dalam berbagai bentuk dan tahapan penyakit;
  • Kehadiran hanya beberapa bakteri dalam biomaterial memungkinkan Anda untuk melihat keberadaan mikroorganisme, karena ini adalah reaksi sensitif;
  • PCR dengan mudah mendiagnosa kekambuhan penyakit.

Meskipun sangat banyak keuntungan, semua pasien dengan kecurigaan terhadap studi tbc tidak dilakukan, karena ada juga kerugian, mereka juga diperhitungkan.

Video

Video - diagnosis dini

Apa kerugiannya?

Metode diagnosis ini agak luar biasa daripada alami, karena ini ada alasannya. Pertama-tama, biaya tinggi dari metode ini diperhitungkan. Peralatannya mahal, klinik umum tidak memiliki kesempatan untuk membelinya karena harga tinggi, tetapi sebagian besar laboratorium berbayar memiliki peralatan, analisis dilakukan di dalamnya.

  • Metode ini mendeteksi bakteri yang mati setelah pengobatan, sementara PCR menunjukkan hasil positif. Segera setelah kemoterapi, tidak masuk akal untuk melakukan penelitian, karena hasilnya tidak dapat diandalkan;
  • Mutasi Mycobacterium tuberculosis rentan, yang menyebabkan inefisiensi dari metode, dan untai DNA tidak dapat disintesis secara konsisten.

Lingkungan untuk penelitian harus dipilih secara hati-hati, darah atau urin hanya dapat dikumpulkan jika ada kecurigaan infeksi. Dahak tidak harus diambil untuk pemeriksaan jika diduga TBC tulang. Dalam situasi ini, diagnosis akan salah.

Darah dan urin pasien dengan tuberkulosis untuk dipelajari pada PCR jarang diambil, identifikasi penyakit dengan cara ini dipertanyakan. Dalam media biologis ini, patogen hanya ditentukan pada sepsis, atau pada kasus tuberculosis yang disebarluaskan. Bentuk lokal adalah yang paling umum, dengan darah dan urine mereka dapat tetap tidak berubah. Paling sering, dahak diambil untuk pemeriksaan.

Siapa yang menunjukkan analisis?

Sebagian besar pasien dikirim untuk diagnosis PCR pada kasus tuberkulosis kontroversial dan sulit. Kapan profesional medis mengeluarkan rujukan untuk penelitian?

  1. Jika ada kontak dengan seseorang yang telah dapat didiagnosis dengan tuberkulosis, tetapi sulit untuk mendiagnosis menggunakan metode konvensional;
  2. Dalam keadaan seperti itu, jika pasien menyediakan klinik tidak mungkin untuk radiografi atau penelitian lain. Dalam situasi seperti itu lebih mudah untuk memeriksanya menggunakan metode polimer. Analisis sputum hanya dikirimkan ke laboratorium dalam wadah khusus, dan hasilnya menjadi diketahui setelah beberapa jam;
  3. Sebelum operasi, sangat penting untuk menentukan apakah pasien sakit tuberkulosis, dalam hal ini PCR diindikasikan;
  4. Karena keamanan metode ini, adalah mungkin untuk melakukan pemeriksaan terhadap wanita hamil atau anak-anak, tanpa menciptakan beban x-ray tambahan;
  5. Hasil tes Mantoux yang meragukan.

Siapa pun yang ingin dapat diperiksa dengan biaya tambahan jika tuberkulosis belum dikonfirmasi dengan bantuan bakteriologi dan fluoroskopi. Hal ini terjadi jika lesi di jaringan paru tidak terlihat dalam gambar-R dalam proyeksi langsung, dan pasien tidak dapat mengumpulkan dahak dengan benar, tetapi tanda-tanda tuberkulosis manusia terganggu.

Reaksi PCR modern untuk diagnosis adalah kunci keberhasilan pengobatan, sebagai akibat dari prevalensi penyakit menurun. Metode tradisional untuk mengidentifikasi penyakit tidak selalu menghasilkan efek yang diinginkan.

Jadi analisis PCR hingga saat ini telah menjadi salah satu metode diagnosis yang andal dan aman pada tahap awal penyakit.

Analisis PCR (diagnosis) tuberkulosis

Tuberkulosis atau phthisis adalah salah satu penyakit menular yang paling populer di abad ke-21. Agen penyebabnya adalah mikroba khusus - tongkat Koch.

Penyakit ini menyebar tidak hanya ke paru-paru, tetapi juga ke otak, pencernaan, sendi atau tulang belakang, sistem urogenital, dan kulit.

Menurut WHO, 10 juta orang menderita tuberkulosis setiap tahun, dimana 3 juta diantaranya berakibat fatal.

Situasi ini sangat menyedihkan di wilayah negara-negara CIS, di sini epidemi tuberkulosis terjadi secara periodik. Rusia, Kazakhstan, Ukraina dikepalai oleh peringkat yang menyedihkan tentang penyebaran infeksi ini.

Infeksi mudah ditularkan melalui tetesan udara atau melalui sistem pencernaan, mempengaruhi organ vital, dan juga dapat dengan cepat beradaptasi dengan obat polimer dan kemoterapi.

Salah satu faktor utama untuk keberhasilan pengobatan tuberkulosis adalah deteksi infeksi yang tepat waktu.

Metode diagnostik

Kemanusiaan telah datang dengan banyak metode untuk mengenali penyakit berbahaya. Diagnosis tuberkulosis dibagi menjadi instrumental dan laboratorium.

Dalam kasus pertama, tes darah untuk tuberkulosis, serta sputum, urin.

Kelompok kedua adalah penelitian menggunakan x-ray dan endoskopi. Metode instrumental untuk mendiagnosis tuberkulosis, pada gilirannya, adalah radiasi dan pembedahan.

Jenis metode radiasi untuk menemukan penyakit

  • Fluorografi adalah metode mendiagnosis penyakit yang dikenal oleh setiap penduduk CIS. Dengan bantuan sinar-X, paru-paru dan kelenjar getah bening hilus diperiksa.
  • X-ray dada - mirip dengan fluorografi, tetapi metode yang lebih baik untuk mendeteksi infeksi. Gambar diperoleh lebih terinci dan dalam dua proyeksi, tetapi prosedur ini sekitar enam kali lebih mahal. Biasanya digunakan setelah kecurigaan serius penyakit telah muncul.
  • Computed tomography dilakukan sebagai diagnosis tambahan, juga digunakan setelah alasan yang baik untuk adanya infeksi.

Metode bedah diagnosis termasuk endoskopi bronkus, serta mediastinoscopy dan thoracocoscopy.

Metode pertama adalah mempelajari pohon bronkus paru-paru dengan bantuan "probe" ke organ ini. Dua metode yang tersisa memungkinkan untuk mempelajari bagian pleura paru-paru dengan menusuk dada.

Ketiga metode ini merupakan intervensi bedah yang serius dan paling sering digunakan dalam proses perkembangan penyakit.

Tes laboratorium meliputi:

  • Analisis sputum untuk tubercle bacillus.
  • Pemeriksaan mikroskopis.
  • Diagnosis PCR tuberkulosis

Apa itu diagnosis PCR?

Salah satu metode diagnosis laboratorium yang paling canggih dari para ahli infeksi adalah reaksi rantai polimerase.

Metode ini dikembangkan oleh ilmuwan terkenal AS, Carrie Mullis pada tahun 1983, di mana ia memenangkan Hadiah Nobel.

Analisis PCR adalah isolasi partikel DNA dari sputum, darah, cairan serebrospinal, feses, dll. untuk biosintesis berikutnya.

Dengan bantuan studi genetik molekuler yang kompleks, sifat mikroba di tubuh pasien ditentukan.

Jenis analisis untuk tuberkulosis ini dilakukan dalam beberapa tahap:

  • Pertama, sampel biologis diambil. Bahan ditempatkan dalam wadah khusus dan dikirim ke laboratorium.
  • Di pusat penelitian, analisis dipanaskan hingga 97 derajat. Ini memungkinkan untuk menghancurkan struktur genom DNA dari mikroorganisme, yang terdiri dari beberapa rantai.
  • Suhu diturunkan secara khusus sehingga primer (peserta DNA dari mana proses biosintesis dimulai) dapat terhubung ke rantai asam deoksiribonukleat.
  • Setelah itu, biosintesis molekul yang diperlukan untuk deteksi dilakukan.

Setelah 25-30 siklus berulang dalam proses penelitian laboratorium, dokter memiliki kesempatan untuk mengenali apakah mikroorganisme infeksi terdapat di tubuh pasien atau tidak.

Keuntungan dan kerugian

PCR untuk tuberkulosis adalah teknik diagnostik paling modern. Metode ini memungkinkan untuk mendeteksi infeksi pada setiap tahap dengan keandalan yang tinggi. Manfaat:

  • Kecepatan - studi tidak lebih dari lima jam. Hasil pengujian untuk mikroba tuberkulosis dapat ditemukan dalam 24 jam.
  • Keamanan - Metode PCR tidak memiliki kontraindikasi usia.
  • Ketepatan waktu - teknik ini dapat mendeteksi tuberkulosis pada tahap-tahap ketika penyakit tidak memiliki gejala.
  • Tingkat akurasi yang tinggi - jika hanya ada beberapa mikroorganisme dalam analisis, mereka akan ditemukan menggunakan reaksi berantai polimerase. Juga, teknik ini memungkinkan untuk dengan mudah mengidentifikasi agen penyebab tuberkulosis.
  • Universalitas - diagnostik digunakan tidak hanya untuk mendeteksi konsumsi, tetapi juga untuk penyakit lain seperti chlamydia, gonorrhea, dll.

Meskipun banyak keuntungan, penggunaan teknik ini dalam praktek medis domestik adalah pengecualian daripada aturannya. Ada sejumlah alasan untuk ini.

Kerugian dari metode ini adalah:

  • Tingginya biaya survei.
  • Metode ini tidak cocok untuk mereka yang telah menjalani terapi, karena kehadiran bakteri Koch mati dapat menyebabkan hasil positif palsu.
  • Dalam kasus mutasi mikroorganisme menular, genom mereka tidak dapat dikenali dengan membuat kesimpulan yang salah.
  • Penting untuk memilih lingkungan deteksi yang tepat. Misalnya, hasil tes darah untuk PCR untuk tuberkulosis (masuknya cairan) akan menjadi negatif jika sistem saraf terinfeksi.
  • Tidak selalu mungkin untuk menerapkan metode ini pada pasien yang didiagnosis dengan lesi paru.

Selain itu, analisis seperti itu untuk tuberkulosis memerlukan peralatan modern yang 90 persen rumah sakit tidak miliki. Di CIS, analisis tersebut dapat dilakukan oleh jaringan klinik Invitro.

Ketentuan analisis

Rekomendasi untuk pasien yang menjalani tes untuk tuberkulosis bervariasi tergantung pada jenis analisis yang mereka lewati.

Ketika mengambil darah untuk PCR, perlu untuk berhenti merokok satu jam sebelum prosedur, untuk dua berhenti minum minuman beralkohol dan makanan berlemak.

Disarankan juga untuk tidak melakukan aktivitas fisik, juga tidak mungkin untuk mengambil darah untuk tuberkulosis saat perut kosong.

Ketika mengambil swab dari mulut dan rongga hidung, Anda tidak bisa makan 2-4 jam sebelum prosedur, jika tidak maka tidak akan informatif. Juga, jangan minum alkohol.

Untuk pembacaan analisis yang akurat, dilarang merokok lebih awal dari satu jam sebelum prosedur. Pada malam itu, hentikan menyikat gigi dan menggunakan semprotan dan semprotan mulut.

Jika Anda mencurigai tuberkulosis sistem urogenital, pasien selama 2-3 hari sebelum persalinan harus mengecualikan seks, selama 2-3 jam sebelum prosedur, jangan pergi ke toilet “dengan cara kecil”. Alat kelamin harus dicuci dengan air biasa tanpa alat khusus.

Wanita disarankan untuk tidak menggunakan tablet vagina, supositoria, bola, dan juga untuk tidak melakukan tes pada hari-hari kritis.

5 hari sebelum pengiriman, hasilnya diperlukan untuk meninggalkan prosedur kolposkopi, serta ultrasound transvaginal,

Kapan diagnostik PCR digunakan?

Tidak setiap klinik memiliki diagnosis yang rumit, tetapi dokter semakin menggunakan metode penelitian semacam itu. Biasanya analisis semacam ini dilakukan dalam situasi khusus.

  • Dalam kasus hasil manta yang diragukan, tes darah untuk tuberkulosis dapat digunakan.
  • Dalam kasus di mana pasien telah melakukan kontak dengan orang yang terinfeksi, tetapi dokter yang hadir tidak dapat secara akurat menentukan diagnosis.
  • Dalam kasus operasi darurat, ketika perlu untuk mengetahui dalam waktu singkat apakah pasien mengalami infeksi ini.
  • Ketika seorang pasien hamil, ketika metode penelitian lain tidak cukup aman untuk bayi yang baru lahir.

Perlu dicatat bahwa diagnosis ini direkomendasikan untuk anak-anak karena keamanannya.

Jika seorang siswa memiliki kontraindikasi terhadap tes tuberkulin, ia mungkin mengambil tes darah untuk tuberkulosis bukan mantel dengan PCR.

Analisis PCR untuk tuberkulosis

Analisis PCR untuk tuberkulosis adalah yang paling populer di antara penelitian medis di bidang penyakit ini.

Tapi bagaimana cara memperingatkan diri sendiri dan orang yang Anda cintai dari penyakit mengerikan ini? Bagaimana cara lulus tes yang diperlukan untuk PCR?

Gejala tuberkulosis dan pencegahannya

Para ahli mengatakan bahwa sekitar 30% dari total populasi menderita tuberkulosis.

Persentase tertinggi penyakit ini dikembangkan di negara-negara yang belum berkembang. Ini paling sering terjadi sebagai akibat dari berkurangnya kekebalan pada manusia.

Penyakit ini adalah salah satu yang tertua. Penyakit ini dapat ditemukan di lapisan otak, di saluran pencernaan, pada sendi dan tulang belakang, dalam sistem kemih dan di patch kecil pada kulit manusia.

Spesialis adalah yang paling mudah untuk menentukan kulit yang terkena. Di situs ada segel kecil, yang seiring waktu bertambah ukurannya, keluar dengan cairan keputihan.

Agen penyebab tuberkulosis paling sering dijemput ketika berbicara dengan orang yang sakit, ketika dia batuk atau bersin. Biasanya, penyakit ini berlangsung tanpa gejala atau memiliki bentuk terbuka, tetapi diagnosis PCR tuberkulosis memungkinkan untuk dideteksi pada tahap awal dan dalam kasus-kasus darurat.

Gejala penyakit: batuk berkepanjangan, demam, menggigil, keringat berlebihan di malam hari, penurunan berat badan yang tajam, rasa lelah dan lemah.

Bentuk penyakit yang terbuka adalah yang paling berbahaya. Seseorang yang menderita tuberkulosis dapat menginfeksi orang sehat.

Gejala penyakit paru yang paling penting adalah hemoptisis. Ini terjadi dalam bentuk penyakit apa pun.

Dalam beberapa situasi, ini dapat menyebabkan pendarahan dari paru-paru seseorang. Ini sangat berbahaya dan membutuhkan intervensi medis yang mendesak.

Untuk pencegahan dan pengakuan tuberkulosis, para ahli meresepkan: sampel - tes tuberkulin, pemeriksaan bahan biologis, fluorografi, sinar-X dan tes darah, dahak atau air liur.

Diagnosis penyakit

Memperbaiki diagnosis penyakit - sudah benar dan selama perawatan dimulai. Dalam kebanyakan kasus, metode biasa mendeteksi patogen tidak selalu memiliki efek dan sudah ketinggalan jaman.

Cara yang paling penting untuk mengidentifikasi dan mendiagnosis penyakit paru adalah tes pemeriksaan medis. Biasanya menggunakan diagnostik PCR. Survei ini baru saja ditemukan, pada tahun 1983, oleh ahli biokimia Amerika, Mullis.

Tes pada pasien dengan tuberkulosis paru dilakukan secara eksklusif dalam kasus-kasus khusus ketika sulit untuk menegakkan diagnosis atau tidak mungkin untuk mendeteksi penyakit secara instrumental.

Reaksi berantai polimerase adalah metode PCR yang andal. Analisis ini memungkinkan untuk menentukan agen penyebab, berapa lama dalam darah, urin dan cairan sumsum tulang belakang. Pemeriksaan medis semacam itu adalah yang paling aman.

Analisis PCR memberikan hasil 100%.

Ia memiliki sensitivitas yang tinggi, yang membantu mengenali penyakit untuk pertama kalinya beberapa jam setelah infeksi, sebelum gejala penyakit muncul. Metode analisis ini memberikan hasil dalam beberapa jam setelah pengiriman bahan biologis. Penaburan analisis ini dilakukan tiga kali, tetapi aspirasi perut yang sakit hanya dilakukan di rumah sakit.

Tiga kriteria dikembangkan untuk menentukan hasil: akurasi tinggi, sensitivitas hingga 90%, spesifisitas.

Tes untuk PCR digunakan dalam beberapa kasus:

  1. untuk mendiagnosis tuberkulosis paru;
  2. menentukan sumber penyakit;
  3. definisi lokalisasi luar paru;
  4. diagnosis kekambuhan.

Evaluasi hasilnya, dan berikan resep perawatan medis yang benar, hanya bisa spesialis. Sangat penting untuk menetapkan skema pengobatan medis yang tepat untuk mendeteksi tuberkulosis, penting untuk melakukan tes untuk kerentanan patogen terhadap perangkat anti-TB.

Berbagai tes medis tuberkulosis

Anda dapat mengambil analisis yang diperlukan dengan dua cara: mengambil darah atau air liur dari seseorang atau mengambil dahak.

Tes darah oleh PCR dapat terdiri dari dua jenis: ELISA dan PCR. Studi semacam itu membantu untuk memantau efektivitas perawatan medis.

ELISA membantu menemukan antibodi dalam tubuh manusia yang melawan mikroba tuberkulosis. Penelitian ini dilakukan sekali sehari. Kerugian utamanya adalah sensitivitasnya yang rendah, yang memungkinkan untuk menentukan hanya penyakit dengan tingkat infeksi yang rendah.

Penelitian yang paling populer dan efektif adalah analisis pada mycobacterium tuberculosis. Dengan dia, dokter dapat dengan mudah menemukan DNA bakteri dalam darah manusia. Metode ini juga digunakan untuk menentukan jumlah bakteri, untuk mengontrol pengobatan pasien, untuk mendeteksi kekambuhan dini.

Saliva PCR adalah salah satu metode penelitian paling modern. Analisis semacam itu akan membantu mengidentifikasi bakteri infeksi dalam air liur. Menggunakan PCR meningkatkan jumlah fragmen DNA dari mikroba berbahaya.

Metode kultur dimaksudkan untuk pemeriksaan dahak manusia, untuk mendeteksi mikroba.

Mempersiapkan pengujian PCR

Perhatian, Anda perlu persiapan air liur yang tepat untuk PCR. Jika semua resep tidak diikuti, analisisnya mungkin salah positif.

Sebelum mengikuti tes, dilarang merokok, makan dan minum obat, serta mengonsumsi alkohol selama 12 jam. Dilarang menggosok gigi, Anda tidak bisa menggunakan bilas, penyegar untuk mulut dan benang gigi.

Dilarang menggunakan lipstik dan masuk ke dalam hubungan intim. Diperbolehkan untuk berkumur dengan air matang;

Pemeriksaan ini akan membantu mengidentifikasi: herpes, klamidia, tuberkulosis, patogen pneumonia, oncoviruses, barolleosis, mononucleosis, HIV, hepatitis dari semua jenis, rubella.

Analisis untuk mycobacteria terutama dilakukan dalam kasus kontroversial, yaitu jika sulit untuk membuat diagnosis atau ada kontak dengan pasien dengan tuberkulosis, sebelum memulai operasi, untuk mendeteksi penyakit. Digunakan untuk pemeriksaan wanita hamil, karena metode ini adalah yang paling aman untuk ibu dan janin.

Kadang-kadang analisis dilakukan di klinik swasta, karena pasien tidak mematuhi aturan untuk pengujian, tetapi pada saat yang sama ia khawatir tentang semua gejala. Analisis ini dapat dilakukan ketika spesialis tidak yakin setelah melakukan tes Mantoux atau pasien adalah seorang anak.

Keuntungan dan kerugian dari tes medis untuk penentuan tuberkulosis

PCR adalah cara paling populer dan efektif untuk menentukan penyakit.

Perbedaan terbesarnya dari penelitian lain adalah hasil yang cepat dan akurat.

Keuntungan dari pemeriksaan medis ini adalah dapat dilakukan untuk pemeriksaan urologi, ginekologi, onkologi, infeksi, hematologi, paru, gastroenterologi dan lainnya.

Keuntungan utama dari penelitian medis semacam itu adalah bahwa tes darah, dahak dan air liur siap dalam waktu singkat (dibutuhkan 5 jam untuk mendeteksi penyakit). Pemeriksaan medis semacam itu memungkinkan dilakukannya tes ketika metode tertentu untuk mempelajari suatu penyakit dilarang atau tidak dapat diakses. Bagus untuk mendeteksi kekambuhan pada manusia.

Berkat analisis ini, menjadi mungkin untuk melakukan penelitian untuk setiap lingkungan biologis. Ini diperbolehkan untuk mengambil materi dari anak-anak. PCR memungkinkan untuk mengidentifikasi agen penyebab pada setiap tahap penyakit. Karena sensitivitasnya yang tinggi, adalah mungkin untuk menemukan mikroba meskipun hanya ada beberapa bakteri.

Metode PCR memperluas kemampuannya. Ini juga digunakan untuk menentukan paternitas, untuk pembuatan gen baru, mutasi, untuk menyilangkan unsur-unsur DNA, dan seterusnya.

Kerugian dari penelitian ini adalah metode survei yang mahal.

Setelah perawatan medis, tes darah dapat menunjukkan adanya patogen hidup atau mati dalam jumlah kecil, setelah pemeriksaan medis, itu akan memberikan hasil yang positif.

Bakteri dan mikroba dapat mengalami mutasi, setelah itu PCR tidak akan dapat mengidentifikasi dan mengidentifikasinya, sehingga hanya spesialis yang dapat meresepkan studi tentang lingkungan yang diperlukan, jika tidak, pemeriksaan medis semacam itu tidak akan efektif.

Setelah pengujian, ada hasil negatif, tetapi ini tidak mengesampingkan kemungkinan seseorang terinfeksi tuberkulosis. Pemeriksaan medis semacam itu dilakukan untuk pasien dengan penyakit paru berat, ketika penelitian lain tidak memberikan hasil yang akurat. PCR akan berguna untuk orang dengan TB paru dan luar paru.

Sayangnya, peralatan medis untuk mendeteksi patogen tuberkulosis sangat mahal.

Rumah sakit umum dan klinik tidak mampu membelinya, tetapi klinik berbayar mengambil tes pasien dan memberikan hasil yang siap pakai dalam waktu singkat.

PCR untuk tuberkulosis

Diagnosis PCR tuberkulosis

Tuberkulosis adalah infeksi spesifik, fokusnya mungkin di jaringan manusia selama bertahun-tahun, dan kemudian menyebar selama beberapa bulan. Ini adalah penyakit kronis yang rejimen pengobatannya yang optimal sulit ditemukan. Salah satu alasan untuk ini adalah diagnosis terlambat, ketika mycobacteria, sementara di tubuh manusia, sudah beradaptasi dengan banyak obat.

Metode diagnosis modern apa yang ada? Diagnostik PCR - apakah itu? Bagaimana penelitian ini dilakukan? Dalam kasus apa tuberkulosis didiagnosis dengan metode ini dan apa esensinya?

Apa itu diagnosis PCR

Ini adalah salah satu metode paling modern untuk mendiagnosis bukan hanya penyakit, tetapi juga mendeteksi bahan biologis. Diagnostik PCR ditemukan baru-baru ini.

Sekitar 30 tahun yang lalu pada tahun 1983, seorang ahli biokimia Amerika, Carey Banks Mullis, mengusulkan skema pemulihan yang kompleks untuk bahan biologis mikroorganisme dalam satu segmen pendek.

Berkat penemuannya, ilmuwan dianugerahi penghargaan tertinggi - Hadiah Nobel.

Apa itu - PCR diagnosis infeksi? Polymerase chain reaction (PCR) adalah diagnosis deteksi penyakit virus, berdasarkan metode rekayasa genetika.

Ini secara luas digunakan dalam mikrobiologi medis, imunologi dan virologi. Metode ini universal dan membantu membuat diagnosis dengan sejumlah kecil bahan.

Identifikasi infeksi dapat secara harfiah pada jam pertama infeksi, jauh sebelum gejala pertama penyakit muncul.

Metode ini terdiri dalam memperoleh dari bahan dari orang sakit bukan patogen itu sendiri, tetapi fragmen dari genom (partikel DNA), biosintesisnya dengan tekad berikutnya yang kelas mikroorganisme materi genetik yang diperoleh milik dengan cara metode genetik molekuler.

Terlepas dari kenyataan bahwa ini adalah proses yang kompleks, dibutuhkan lebih sedikit waktu daripada banyak metode biologis untuk mendeteksi agen infeksi. Hanya dalam beberapa jam, mikroorganisme dapat dideteksi oleh PCR.

Untuk melakukan ini, tidak perlu mengisolasinya dari lingkungan (darah, cairan serebrospinal, sputum) dan menumbuhkannya untuk waktu lama pada media nutrisi buatan.

Cukup bahwa sebagian kecil dari untai DNA dari agen infeksius hadir dalam materi yang diteliti.

Dasar dari reaksi adalah kemungkinan dalam kondisi buatan (in vitro) untuk menciptakan sintesis molekul asam nukleat dari agen infeksi.

Apa yang dibutuhkan untuk PCR?

  1. Primer adalah segmen DNA dari mana biosintesis atau penciptaan dimulai.
  2. Nukleotida atau senyawa kompleks yang merupakan dasar dari molekul DNA atau RNA.
  3. Reaksi rantai polimerase tidak mungkin tanpa kehadiran polimerase, yang merupakan enzim mempercepat PCR.

Tahapan diagnostik PCR

Bagaimana diagnosis molekuler dilakukan oleh PCR? Prosedurnya sederhana dan membutuhkan waktu yang singkat, dengan mempertimbangkan pengumpulan materi.

  1. Sebelum memulai penelitian, ambil bahan biologis yang diperlukan - ini adalah air pencuci tenggorokan, darah, isi lambung, dan dahak. Jenis bahan biologis tergantung pada patogen yang dicurigai.
  2. Denaturasi atau perusakan struktur primer DNA, yang terdiri dari dua rantai. Inti dari tahap ini adalah untuk memisahkan dua sirkuit di bawah pengaruh suhu tinggi (maksimum adalah 98 ºC, yang berlangsung tidak lebih dari dua menit).
  3. Pada tahap selanjutnya dari PCR, yang disebut annealing, suhu dikurangi dengan beberapa derajat sehingga primer akan mengikat untai DNA.
  4. Elongasi, di mana sintesis molekul yang diinginkan terjadi secara langsung.

Akibatnya, hanya 25-30 siklus seperti itu yang menerima jumlah salinan DNA mikroorganisme yang diperlukan, yang mudah dikenali.

Tidak mungkin bagi semua orang yang dicurigai tuberkulosis untuk melakukan PCR, karena metode ini membutuhkan peralatan yang mahal. Tidak semua klinik umum mampu membelinya. Selain itu, begitu kebetulan bahwa metode biasa untuk mendiagnosis infeksi pada kebanyakan kasus juga membenarkan diri mereka sendiri.

Ini termasuk:

  • survei pasien, pengambilan riwayat;
  • pemeriksaan penuh orang tersebut;
  • penelitian menggunakan uji Mantoux tuberkulin;
  • X-ray atau fluorografi
  • diagnosa komputer jika perlu;
  • metode penelitian mikrobiologi: smear microscopy dan pemeriksaan bakteriologis sputum.

PCR untuk tuberkulosis dilakukan dalam kasus-kasus khusus ketika sulit untuk membuat diagnosis atau tidak mungkin untuk melaksanakan metode instrumental lainnya.

Meskipun metode diagnostik melimpah, kejadian tuberkulosis terus tumbuh. Saat ini, tidak hanya pertumbuhannya, tetapi juga fitur lainnya:

  • penyakit ini sering terjadi dalam bentuk parah;
  • jumlah kasus yang fatal meningkat;
  • semakin kebal terhadap obat kemoterapi modern yang didiagnosis.

Keengganan orang-orang itu sendiri untuk menjalani pemeriksaan medis rutin setiap tahun, penolakan vaksinasi mengarah pada penyebaran tuberkulosis. Dalam kondisi seperti itu, diperlukan metode penelitian yang cepat, informatif dan efektif, yang harus dapat diakses oleh anak-anak dan orang dewasa. Semua metode diagnostik di atas jauh lebih rendah daripada PCR.

Manfaat mendiagnosis tuberkulosis dengan PCR

Penelitian ini, meskipun baru, telah terbukti dengan baik, terutama dalam kasus-kasus kontroversial di mana tidak mungkin untuk membuat diagnosis karena sejumlah alasan.

Berkat PCR, jauh lebih mudah untuk mendeteksi agen penyebab tuberkulosis dalam bahan uji.

Keuntungan diagnostik PCR adalah sebagai berikut.

  1. Ini adalah analisis cepat. Sebuah fragmen kecil dari molekul DNA dapat digunakan untuk mendiagnosis hanya dalam beberapa jam (sekitar lima), yang berhasil digunakan dalam situasi darurat ketika, misalnya, sebelum operasi diperlukan untuk menentukan apakah seseorang sakit dengan tuberkulosis.
  2. Analisis PCR diperbolehkan dalam kasus ketika metode lain tidak tersedia atau dilarang (untuk mendeteksi tuberkulosis paru, kadang-kadang perlu untuk mengambil beberapa gambar radiografi, yang akan membuat dosis radiasi yang besar).
  3. Dengan bantuan PCR, setiap lingkungan biologis diperiksa untuk kehadiran patogen di dalamnya. Misalnya, Anda dapat melakukan studi cairan serebrospinal, jika ada kecurigaan meningitis TB.
  4. Menerapkan diagnosis PCR penyakit menular pada anak-anak, karena metode ini aman.
  5. Memungkinkan Anda mengidentifikasi patogen pada setiap tahap penyakit.
  6. Sensitivitas tinggi PCR memungkinkan untuk mendeteksi Mycobacterium tuberculosis, bahkan jika hanya ada beberapa mikroorganisme dalam bahan biologis.
  7. Adalah baik untuk melaksanakan diagnosis kekambuhan penyakit.

Setelah semua membaca PCR tampaknya metode diagnostik hampir sempurna, yang harus dilakukan untuk semua orang dengan kecurigaan tuberkulosis. Tetapi ada juga kerugian di sini, mereka harus dipertimbangkan.

Kekurangan PCR dalam diagnosis tuberkulosis

Di zaman kita, diagnostik seperti itu lebih jarang daripada keteraturan. Dan untuk ini ada alasannya.

  1. Ini adalah metode penelitian yang mahal. Di banyak klinik, peralatan untuk PCR tidak ada karena biaya tinggi, tetapi analisis masih dapat dilakukan di laboratorium berbayar.
  2. Segera setelah perawatan, mycobacteria mati atau hidup dalam jumlah kecil mungkin masih ada di tubuh manusia (hasilnya akan positif selama diagnostik PCR), sehingga metode ini tidak akurat pada saat ini, tidak masuk akal untuk melaksanakannya.
  3. Mutasi mikobakteria menghasilkan PCR yang tidak efektif - urutan DNA untai normal tidak dapat disintesis.
  4. Perlu untuk memilih lingkungan yang tepat untuk penelitian, darah diambil hanya jika dicurigai terinfeksi (sepsis), tidak perlu mengambil dahak jika ada pertanyaan tuberkulosis pada organ sistem saraf. Dalam hal ini, PCR tidak akan dapat mendeteksi patogen dan diagnosis akan menjadi tidak informatif.

Indikasi untuk mendeteksi tuberkulosis menggunakan analisis PCR

Diagnosis PCR tuberkulosis paling sering dilakukan dalam kasus-kasus kontroversial. Kapan dokter merujuk penelitian ini?

  1. Jika sulit untuk membuat diagnosis menggunakan metode yang biasa tersedia, tetapi ada kontak dengan pasien dengan tuberkulosis.
  2. Dalam kasus ketika tidak mungkin untuk membawa seseorang ke poliklinik untuk pemeriksaan rutin rutin untuk tuberkulosis, lebih mudah untuk memeriksanya menggunakan PCR, karena dahak untuk pemeriksaan dapat disampaikan dalam botol dan diagnosis dikonfirmasi dalam beberapa jam.
  3. Jika seseorang akan menjalani operasi darurat dan sangat mendesak untuk mengetahui apakah dia sakit dengan tuberkulosis.
  4. Jika perlu, wanita hamil juga lebih baik untuk skrining tuberkulosis menggunakan PCR, karena metode ini aman.
  5. Atas dasar bayaran, siapa saja yang belum mengkonfirmasi tuberkulosis dengan metode bakteriologis dan fluoroskopi dapat menjalani diagnosis. Hal ini terjadi ketika lesi di paru-paru tidak terlihat dalam gambar langsung, dan orang selama pengiriman dahak untuk penelitian tidak dapat mengikuti rekomendasi untuk pengumpulan materi yang benar. Dalam hal ini, seseorang khawatir tentang semua gejala karakteristik tuberkulosis paru.
  6. Ketika ada keraguan tentang hasil tes Mantoux.
  7. Lebih baik untuk melakukan diagnosis PCR tuberkulosis pada anak-anak. Prosedur ini aman, tidak menciptakan paparan radiasi tambahan, dan efektif dalam mendeteksi sulit untuk mendiagnosis bentuk penyakit.

Diagnosis tuberkulosis tepat waktu adalah kunci untuk pengobatan yang diresepkan dengan benar dan mengurangi penyebaran penyakit. Seringkali, metode deteksi penyakit yang akrab tidak selalu efektif. Oleh karena itu, PCR saat ini adalah salah satu cara yang paling andal dan aman untuk mendeteksi infeksi pada tahap awal perkembangannya.

Tes darah untuk tuberkulosis oleh PCR

PCR untuk tuberkulosis diperlukan untuk ditularkan kepada siapa saja yang ingin mengetahui nuansa kondisi mereka untuk penyakit ini.

Untuk menghilangkan penyemaian pada kasus suspek tuberkulosis pada lesi paru, pilihan terbaik adalah menggunakan isi lambung (ini menentukan indikator seperti immunoglobulin, ESR, mycobacteria dan leukocytes).

Selain itu, tomografi, tes Mantoux, ELISA dapat digunakan untuk mengkonfirmasi diagnosis atau jika tuberkulosis dicurigai.

Informasi umum

PCR dianjurkan di pagi hari.

Sangat dianjurkan untuk melakukan sebelum isi perut dikosongkan dari seluruh sputum yang ditelan pada malam hari (hari tuberkulosis terakhir yang dihabiskan untuk mengatur ini).

Dalam hal ini, PCR untuk keberadaan tuberkulosis diperlukan, seperti tomografi, ELISA dan Mantoux. Mereka memungkinkan Anda untuk mengidentifikasi mycobacteria dan kondisi urine, ESR, total immunoglobulin dan menentukan keadaan paru-paru saat ini.

Perlu dicatat bahwa analisis untuk tuberkulosis harus dilakukan sesuai dengan standar tambahan dan dengan mempertimbangkan beberapa nuansa:

  • Penaburan dilakukan selama tiga kali, namun, aspirasi segala sesuatu yang ada di perut, perlu dilakukan di rumah sakit;
  • penyemaian kehadiran massa di perut mengungkapkan mycobacteria dalam kurang dari 50% diagnosa, bahkan di bawah kondisi yang paling optimal - USG dianjurkan, bukan mereka;
  • hasil negatif tidak dapat mengecualikan kemungkinan mengembangkan tuberkulosis, di mana ESR, imunoglobulin dan indikator lainnya berubah;
  • bahkan kurang rentan terhadap pembenihan bahan PCR untuk kondisi patologis yang diperoleh dalam rangka pemeriksaan bronkoskopi, tidak termasuk kecurigaan tuberkulosis paru pada anak-anak.

Lebih lanjut tentang PCR

Jika tes darah untuk tuberkulosis dan sampel serupa positif (ini menegaskan Mantoux, tomografi, ELISA dan diagnostik tambahan), penunjukan terapi anti-TB diperlukan. Ini juga diperlukan dalam kasus lain, yaitu ketika menghubungi dengan seseorang dengan virus tuberkulosis, yang menegaskan x-ray paru-paru dan gejala umum.

Untuk mengidentifikasi algoritma pengobatan, ketika mengidentifikasi darah untuk tuberkulosis, hasil identifikasi kerentanan terhadap agen spesifik dari patogen digunakan.

Itu harus diperoleh sebagai bagian dari pemeriksaan pasien yang telah melakukan kontak dengan pasien. Dalam hal ini, diagnosis juga harus mencakup tindakan seperti Mantoux, tomografi, urinalisis, dan dalam kaitannya dengan mycobacteria.

Tidak ada kriteria yang kurang penting adalah antibodi terhadap tuberkulosis pada anak-anak dan orang tua.

Jika pasien dan sumber infeksinya tidak diketahui, dan juga jika ia telah mengidentifikasi adanya strain resisten tuberkulosis, materi (urin, sputum) yang diperoleh dari seseorang ditaburkan. Hasil dalam hal kondisi paru-paru di mana diagnosis didasarkan adalah penting untuk orang dewasa dan ketika meresepkan perawatan untuk anak.

Keuntungan dari metode ini

Tes darah untuk tuberkulosis, seperti PCR, memiliki kelebihannya.

Yang terakhir dari metode yang disajikan adalah metode utama, berdasarkan identifikasi rasio asam nukleat dalam kaitannya dengan mycobacteria, yang digunakan pada pasien dengan tuberkulosis.

Sebagai pengidentifikasi komponen tuberkulosis, urutan DNA tipe nukleotida khusus digunakan, yang harus dilalui dan analisis umum anak-anak harus dilakukan.

Perlu dicatat bahwa diagnosis tuberkulosis paru pada orang dewasa dan dalam pelaksanaan anak, mengungkapkan kekhususan dan kerentanan berbagai pilihan. Pada saat yang sama, akurasi PCR lebih dari 90% (untuk kultur sputum dan urin, hasil yang dilaporkan harus diambil sebagai 100% sehubungan dengan mycobacteria).

Teknik instrumental direkomendasikan sebagai gantinya.

Dibandingkan dengan diagnosis klinis tuberkulosis paru pada anak-anak, perlu dicatat bahwa spesifisitas PCR dapat bervariasi dari 80 hingga 100%. Kerentanan adalah dari 25 hingga 83% pada anak-anak dan orang tua.

Tes Mantoux (yang disebut diagnosis tuberkulin), serta tomografi dan koleksi total, dapat menunjukkan hasil akhir yang lebih akurat. Dalam hal ini, direkomendasikan diagnostik tambahan dengan bantuan mereka.

Ini sangat diperlukan untuk mengidentifikasi rasio urin dan imunoglobulin dalam kaitannya dengan anak dan orang lain yang membutuhkan diagnosis paling menyeluruh.

Kekurangan PCR

Berbicara tentang keuntungan PCR dalam mengidentifikasi lesi pada sistem paru, seseorang tidak dapat tetapi mencatat kerugian dari teknik yang disajikan, khususnya, bahwa:

  • hasil negatif PCR tidak bisa 100% faktor yang menunjukkan tidak adanya penyakit dan patologi, bukan jenis lain;
  • PCR tidak selalu dapat digunakan pada orang dengan lesi yang diperparah dari sistem paru dan dalam situasi di mana tidak mungkin untuk menentukan diagnosis sesuai dengan data tertentu;
  • PCR paling tidak berguna dalam mengidentifikasi tuberkulosis pada orang dengan imunodefisiensi, serta dalam mendiagnosis penyakit tipe ekstrapulmoner.

Metode diagnostik lain dan Hari Tuberkulosis Dunia menunjukkan bahwa mikobakteria paling baik diidentifikasi ketika tomografi, pengujian Mantoux dan kegiatan lain dilakukan pada anak-anak dan orang tua.

Teknik diagnostik lainnya

Banyak pedoman, seperti Hari Tuberkulosis Dunia, menunjukkan bahwa diagnostik akan paling menunjukkan menggunakan berbagai teknik: tomografi, tes Mantoux, urinalisis, dan metode tambahan untuk identifikasi mycobacterium. Kriteria penting dalam pelaksanaan diagnosis adalah urutan dan frekuensinya.

Ahli paru merekomendasikan analisis holistik dan Mantoux untuk penyakit yang dicurigai, sebelum memulai pengobatan, 2-3 kali selama siklus pemulihan dan satu bulan setelahnya.

Selain itu, metode tambahan ditunjukkan untuk menjawab pertanyaan tentang bagaimana diuji untuk tuberkulosis.

Kami berbicara tentang fluorografi, tusukan, bronkoskopi dan bahkan ultrasound (tidak informatif dalam semua situasi yang melibatkan tuberkulosis, oleh karena itu, tes darah tambahan dan sputum harus dilakukan, Mantoux).

Sebaliknya, itu tidak dapat diterima untuk melakukan tes lain, karena mereka tidak akan 100% efektif.

Informasi tambahan

Untuk membuat Hari Tuberkulosis Dunia hari yang kurang populer, karakteristik tambahan harus diperhitungkan ketika mendiagnosis mikobakteria. Salah satu tujuan PCR adalah untuk menghilangkan pembentukan komplikasi dan kemungkinan tidak termasuk peradangan.

Dalam hal ini, perhatian harus diberikan kepada tusukan, sebagai metode untuk menghilangkan rasio dahak yang berlebihan. Metode ini mungkin tidak digunakan dalam semua situasi, tetapi itu dirasakan oleh banyak pulmonologists tidak hanya sebagai ukuran diagnostik, tetapi juga sebagai yang terapeutik. Oleh karena itu, sebelum menerapkannya, Anda harus berkonsultasi dengan spesialis dan melakukannya di setiap tahap perkembangan penyakit.

Mengingat kelebihan dan kekurangan PCR, dapat dikatakan bahwa untuk diagnosis yang paling akurat adalah benar untuk menggunakan teknik tambahan. Ini akan memungkinkan Anda untuk menentukan dengan tingkat akurasi maksimum tingkat kerusakan pada tubuh dan kemungkinan komplikasi. Dengan pendekatan ini diagnosis dapat berbicara tentang pengobatan yang efektif dari penyakit.

PCR untuk tuberkulosis - diagnosis tuberkulosis

PCR untuk tuberculosis atau polymerase chain reaction adalah cara paling modern dan canggih untuk mendiagnosis suatu penyakit. Apa keunggulannya dibandingkan dengan metode lain, dan apakah itu benar-benar membenarkan diri?

Tuberkulosis adalah penyakit menular yang sangat serius yang menewaskan jutaan orang. Dan sekarang kesengsaraan berbahaya ini mengiringi planet ini, menghancurkan keluarga dan bahkan seluruh permukiman.

Di negara-negara beradab, banyak metode inovatif digunakan untuk mendiagnosis infeksi pada tahap awal, yang memungkinkan untuk bertahan dari serangan penyakit mematikan. Salah satu metode ini adalah tes darah PCR untuk tuberkulosis.

Bagaimana cara kerjanya, dan mengapa para pengembang teknik ini menjamin banyak keuntungan dari kreasi mereka?

Inti dari metode diagnosis

PCR, atau sebaliknya, reaksi berantai polymerase adalah metode yang relatif baru dan inovatif dengan caranya sendiri, yang memungkinkan untuk mengidentifikasi agen penyebab penyakit infeksi dalam hitungan jam.

Darah dari pembuluh darah sebagian besar digunakan sebagai bahan untuk penelitian, tetapi bahan biologis lainnya juga hadir, seperti:

  • air liur;
  • urin;
  • Mengerik benar-benar bagian tubuh mana pun;
  • debit dari alat kelamin;
  • tinja;
  • cairan tulang belakang.

Dengan demikian, kelebihan PCR adalah faktor-faktor berikut:

  • Mutlak, deteksi 100 persen mikobakteria dalam materi biologi, kecuali tentu saja bakteri yang Anda cari benar-benar ada dalam tubuh manusia.
  • Masalah informasi tidak hanya pada ketersediaan, tetapi juga pada jumlah basil dalam sampel yang diteliti.
  • Kecepatan tinggi dari penelitian yang diperlukan. 4 jam dan hasil pasti diketahui.
  • Deteksi tidak hanya agen penyebab tuberkulosis, tetapi juga bakteri asal lainnya. Sangat penting untuk menyoroti fakta bahwa metode ini bahkan mengungkap infeksi HIV.
  • Pemeriksaan detail paru-paru, yang tidak mungkin jika Anda menggunakan tes darah lain untuk mycobacteria.
  • Berfungsi pada tingkat DNA, yang berarti menjamin hasil yang akurat.

Diagnostik PCR tuberkulosis mengungkapkan kecenderungan untuk infeksi dengan penyakit ini jauh sebelum diketahui dari penelitian lain, seperti fluorografi.

Artinya, pada kenyataannya, dengan bantuan teknik baru, adalah mungkin untuk memprediksi masa depan - apakah seseorang akan sakit dengan tuberkulosis setelah beberapa waktu, atau tidak? Dan tidak masalah apakah tes itu dilakukan pada orang dewasa atau pada anak.

Pada saat yang sama, pada tahap awal penyakit, adalah mungkin untuk secara akurat menentukan asal mycobacteria yang menyebabkan infeksi, serta sifat-sifatnya (resistensi terhadap obat-obatan kelompok tertentu, bertahan hidup, dll.).

Mengetahui hampir semua hal tentang penyakit ini, Anda dapat membuat rencana yang paling efektif untuk memerangi penyakit yang ada. Juga menggunakan analisis PCR, menjadi mungkin untuk melindungi pasien dari orang yang sehat secara tepat waktu, sehingga mencegah penyebaran infeksi lebih lanjut.

Bagaimana menuju biomaterial

Analisis PCR adalah prosedur yang sangat rumit, meskipun hanya membutuhkan rata-rata 4 jam. Keakuratan hasil dapat dipengaruhi oleh berbagai faktor yang mungkin tampak seperti sepele belaka bagi rata-rata manusia. Salah satu faktor tersebut adalah pengumpulan sampel untuk penelitian.

Memang, mungkin tampak bahwa tidak ada yang sulit, dan siapa pun, bahkan seorang anak, dapat mengatasinya.

Bahkan, ketika mengumpulkan sampel untuk mendiagnosis tuberkulosis, satu aturan yang sangat penting harus diperhatikan: perlu bahwa semua orang harus berinteraksi dengan ketika mengumpulkan tes harus steril atau sebersih mungkin.

Sebagai contoh, ketika menggunakan darah dari pembuluh darah sebagai biomaterial, analisis dilakukan oleh spesialis berpengalaman dengan jarum suntik steril.

Sampel dikumpulkan dalam tabung reaksi dan di seluruh studi dioperasikan dalam kondisi khusus yang mencegah pembekuan darah.

Tes urin untuk mycobacterium tuberculosis biasanya diambil di pagi hari ketika seseorang baru bangun dan pergi ke toilet. Dalam hal ini, wadah untuk mengumpulkan sampel harus steril, dan sebelum mengumpulkan perlu menjalani prosedur air.

Kotoran kelamin pria dan wanita dilakukan oleh dokter yang tepat di fasilitas medis.

Pengumpulan tes kompleks, misalnya, cairan sumsum tulang belakang, dilakukan oleh spesialis yang memenuhi syarat di bawah kondisi steady-state.

Biasanya, PCR darah untuk tuberkulosis diresepkan dalam kasus-kasus berikut:

  • setelah menerima hasil kontroversial setelah fluorografi;
  • dengan sedikit kecurigaan untuk mendeteksi patologi terlebih dahulu dan mengambil tindakan yang tepat;
  • jika seseorang hidup dikelilingi oleh kerabat dengan tuberkulosis.

Referensi untuk tes PCR dapat diperoleh dari dokter seperti pulmonologist, spesialis TB atau terapis. Diagnosis tuberkulosis pada anak-anak dengan PCR biasanya diresepkan oleh dokter anak.

Bagaimana PCR dilakukan

Tes darah untuk tuberkulosis bukanlah prosedur sederhana. Ini karena banyak aspek, ketaatan yang wajib. Ini yang pertama. Kedua, proses menganalisis darah untuk tuberkulosis melibatkan tindakan kompleks dan manipulasi dengan sampel.

Karena penelitian ini menunjukkan hubungan yang erat dengan proses pada tingkat DNA, seorang spesialis membutuhkan konsentrasi maksimum ketika bekerja dengan biomaterial.

Singkatnya, gambaran keseluruhan hasil adalah sebagai berikut:

  1. Dengan manipulasi mekanik dan kimia, zat yang diperlukan dilepaskan dari sampel.
  2. Maka proses diagnostik membutuhkan kerja dengan DNA patogen, yaitu, perlu untuk memulai reaksi berantai dari penggandaan DNA.
  3. Selanjutnya, beberapa reaksi rantai DNA ditambahkan dalam urutan tertentu, yang membentuk sandi.
  4. Tahap terakhir adalah dekripsi data dan penerbitan hasil.

Perlu dicatat bahwa penanda pada akhirnya dapat memberikan dua jenis jawaban: sederhana atau kompleks. Sederhana itu positif atau negatif. Hasil yang sulit diperoleh dengan sangat menguraikan elemen DNA, tetapi selain informasi tentang ada atau tidaknya mycobacterium tuberculosis di dalam tubuh, informasi tambahan dapat diperoleh.

2 defisiensi PCR untuk tuberkulosis: tes darah untuk diagnosis

Infeksi tuberkulosis spesifik telah hadir di jaringan dan struktur manusia selama bertahun-tahun, dan dalam keadaan tertentu menyebar dengan cepat ke seluruh tubuh dalam 2-3 bulan. Kadang-kadang sangat sulit untuk memilih pengobatan yang optimal karena diagnosis terlambat dan adaptasi patogen terhadap banyak obat-obatan.

Diagnosis PCR tuberkulosis terbaru membantu mendeteksi tidak hanya penyakit yang sudah berkembang, tetapi juga patogen itu sendiri, ketika tanda-tanda pertama penyakit itu belum muncul.

Apa itu PCR?

Diagnosis tuberkulosis oleh PCR telah muncul baru-baru ini. Pada tahun 1983, seorang ahli mikrobiologi dari Amerika, Cary Mullis, menemukan prosedur di mana mikroorganisme dapat direkonstruksi dari bahan biologis dalam segmen pendek. Karya ini telah meraih Hadiah Nobel.

PCR untuk tuberkulosis adalah proses rantai polimer di mana diagnosis dan deteksi patogen virus oleh rekayasa genetika. Teknik ini digunakan di laboratorium imunologi, mikrobiologi, virologi dan biokimia.

Metode universal membantu dokter mendiagnosis dan mendeteksi proses infeksi bahkan setelah jam pertama infeksi, jauh sebelum timbulnya gejala. Penelitian dimungkinkan bahkan dengan sejumlah kecil biomaterial.

Apa yang dibutuhkan untuk analisis?

  • Beberapa potongan DNA (primer), yang dengannya sintesis biologis dimulai;
  • Senyawa nukleotida, dasar dari molekul DNA atau RNA;
  • Enzim polimerase yang mempercepat analisis PCR.

Apa dasar dari metode ini?

Pertama, segmen DNA diekstrak dari biomaterial dari orang yang terinfeksi, menggunakan metode biosintesis gen-molekul, jenis mikroorganisme yang dimiliki biofragmen lebih lanjut ditentukan.

Reaksi kompleks ini membutuhkan waktu lebih sedikit daripada beberapa biomethods. PCR menentukan patogen dalam beberapa jam, sementara tidak perlu mengisolasinya dari cairan biologis (dahak, serebrospinal atau darah sedang), tidak perlu menumbuhkannya untuk waktu yang lama dalam medium nutrisi. Cukup bahan yang dipelajari mengandung untai DNA dari patogen infeksius.

Ketika melakukan tes darah PCR untuk tuberkulosis in vitro, sintesis asam ribonukleat dari mycobacterium tuberculosis dibuat secara artifisial.

Tahapan diagnosis

Reaksi molekuler oleh PCR adalah prosedur sederhana yang membutuhkan sedikit waktu. Biomaterial yang diperlukan diambil: darah, dahak, cairan pencucian bronkial digunakan untuk menentukan tbc.

  1. Pertama, bentuk utama DNA dihancurkan, 2 rantai dipisahkan pada suhu tinggi (maksimum 98 ° C selama tidak lebih dari 2 menit);
  2. Kemudian anil dilakukan, suhu primer dikurangi oleh beberapa divisi, untai DNA dihubungkan dengan primer;
  3. Tahap selanjutnya disebut elongasi, dengan biosintesis struktur molekul yang diperlukan.

Untuk mendapatkan jumlah salinan DNA yang diperlukan, 25 hingga 30 siklus tersebut harus lulus, dan jumlah mikobakteri yang dihasilkan mudah dikenali.

Apakah perlu untuk melakukan PCR untuk tuberkulosis?

Langsung ke semua pasien dengan dugaan TVC, diagnosis rantai tidak dilakukan, karena prosedur memerlukan penggunaan peralatan yang mahal. Tidak semua lembaga medis negara memungkinkan untuk dibeli, terutama karena metode yang biasa digunakan untuk mendiagnosis mycobacterium tuberculosis juga bersifat informatif.

  • Hati-hati mengambil anamnesis, interogasi pasien;
  • Inspeksi visual;
  • Tes tuberkulin Mantoux;
  • Pemeriksaan radiografi atau fluorografi;
  • Jika perlu, diagnostik komputer;
  • Pemeriksaan mikroskopis atau bakteriologis dari masker dengan dahak.

PCR untuk tuberkulosis hanya dilakukan bila tidak mungkin untuk melakukan analisis instrumen lain atau dalam keadaan yang sulit didiagnosis.

Terlepas dari kenyataan bahwa mereka telah menemukan berbagai macam metode diagnostik, jumlah pasien dengan tuberkulosis terus bertambah. Selain itu, insidensi telah memperoleh beberapa fitur: bentuk parah dari penyakit ini sering diamati, jumlah kematian meningkat, patogen menjadi resisten terhadap obat kemoterapi yang ada.

Banyak orang tidak mau menjalani pemeriksaan rutin setiap tahun, menolak vaksinasi, yang mengarah pada peningkatan insidensi. Keadaan seperti itu membutuhkan metode penelitian yang efektif dan informatif tersedia untuk orang dewasa dan anak-anak yang didiagnosis dengan tbc. PCR memiliki kelebihan dibandingkan metode diagnostik lainnya.

Berapa nilai dari metode ini?

Penelitian terbaru ini telah terbukti dengan baik. Jika untuk sejumlah alasan sulit untuk membuat diagnosis atau dalam beberapa kasus kontroversial, PCR dapat mendeteksi basil tuberkulum lebih mudah dalam bahan biologis daripada metode lain.

  • Studi cepat ini, segmen kecil dari molekul memungkinkan untuk membuat diagnosis yang akurat dalam waktu singkat dalam sekitar 5 jam, ini digunakan dalam kasus-kasus darurat, misalnya, sebelum intervensi bedah mendesak;
  • Tes darah untuk tuberkulosis adalah mungkin ketika metode lain tidak tersedia atau kontraindikasi - kadang-kadang, untuk mendeteksi patogen tbc, ada banyak gambar Rg yang akan diambil, dosis iradiasi yang terlalu besar;
  • Dengan menggunakan reaksi polimerase, setiap cairan biologis dapat diperiksa untuk keberadaan mikobakteria. Misalnya, Anda dapat melakukan studi cairan serebrospinal di meningitis TB atau urin di tuberkulosis urogenital;
  • Metode ini aman, diagnosis tuberkulosis pada anak-anak yang menggunakan PCR tidak menimbulkan kesulitan;
  • Metode reaksi polimer mengungkapkan tubercle bacillus dalam berbagai bentuk dan tahapan penyakit;
  • Kehadiran hanya beberapa bakteri dalam biomaterial memungkinkan Anda untuk melihat keberadaan mikroorganisme, karena ini adalah reaksi sensitif;
  • PCR dengan mudah mendiagnosa kekambuhan penyakit.

Meskipun sangat banyak keuntungan, semua pasien dengan kecurigaan terhadap studi tbc tidak dilakukan, karena ada juga kerugian, mereka juga diperhitungkan.

Video

Video - diagnosis dini

Apa kerugiannya?

Metode diagnosis ini agak luar biasa daripada alami, karena ini ada alasannya. Pertama-tama, biaya tinggi dari metode ini diperhitungkan. Peralatannya mahal, klinik umum tidak memiliki kesempatan untuk membelinya karena harga tinggi, tetapi sebagian besar laboratorium berbayar memiliki peralatan, analisis dilakukan di dalamnya.

  • Metode ini mendeteksi bakteri yang mati setelah pengobatan, sementara PCR menunjukkan hasil positif. Segera setelah kemoterapi, tidak masuk akal untuk melakukan penelitian, karena hasilnya tidak dapat diandalkan;
  • Mutasi Mycobacterium tuberculosis rentan, yang menyebabkan inefisiensi dari metode, dan untai DNA tidak dapat disintesis secara konsisten.

Lingkungan untuk penelitian harus dipilih secara hati-hati, darah atau urin hanya dapat dikumpulkan jika ada kecurigaan infeksi. Dahak tidak harus diambil untuk pemeriksaan jika diduga TBC tulang. Dalam situasi ini, diagnosis akan salah.

Darah dan urin pasien dengan tuberkulosis untuk dipelajari pada PCR jarang diambil, identifikasi penyakit dengan cara ini dipertanyakan. Dalam media biologis ini, patogen hanya ditentukan pada sepsis, atau pada kasus tuberculosis yang disebarluaskan. Bentuk lokal adalah yang paling umum, dengan darah dan urine mereka dapat tetap tidak berubah. Paling sering, dahak diambil untuk pemeriksaan.

Siapa yang menunjukkan analisis?

Sebagian besar pasien dikirim untuk diagnosis PCR pada kasus tuberkulosis kontroversial dan sulit. Kapan profesional medis mengeluarkan rujukan untuk penelitian?

  1. Jika ada kontak dengan seseorang yang telah dapat didiagnosis dengan tuberkulosis, tetapi sulit untuk mendiagnosis menggunakan metode konvensional;
  2. Dalam keadaan seperti itu, jika pasien menyediakan klinik tidak mungkin untuk radiografi atau penelitian lain. Dalam situasi seperti itu lebih mudah untuk memeriksanya menggunakan metode polimer. Analisis sputum hanya dikirimkan ke laboratorium dalam wadah khusus, dan hasilnya menjadi diketahui setelah beberapa jam;
  3. Sebelum operasi, sangat penting untuk menentukan apakah pasien sakit tuberkulosis, dalam hal ini PCR diindikasikan;
  4. Karena keamanan metode ini, adalah mungkin untuk melakukan pemeriksaan terhadap wanita hamil atau anak-anak, tanpa menciptakan beban x-ray tambahan;
  5. Hasil tes Mantoux yang meragukan.

Siapa pun yang ingin dapat diperiksa dengan biaya tambahan jika tuberkulosis belum dikonfirmasi dengan bantuan bakteriologi dan fluoroskopi. Hal ini terjadi jika lesi di jaringan paru tidak terlihat dalam gambar-R dalam proyeksi langsung, dan pasien tidak dapat mengumpulkan dahak dengan benar, tetapi tanda-tanda tuberkulosis manusia terganggu.

Reaksi PCR modern untuk diagnosis adalah kunci keberhasilan pengobatan, sebagai akibat dari prevalensi penyakit menurun. Metode tradisional untuk mengidentifikasi penyakit tidak selalu menghasilkan efek yang diinginkan.

PCR diagnosis tuberkulosis paru pada anak-anak dan orang dewasa: apa itu dan bagaimana cara melakukannya?

Polymerase chain reaction (PCR) adalah metode modern dan efektif untuk mendiagnosis banyak penyakit, termasuk tuberkulosis. Prosedur ini memungkinkan Anda untuk dengan cepat menentukan agen penyebab berbagai penyakit. Akibatnya, PCR untuk tuberkulosis membantu pasien dan dokter pada waktunya untuk memulai terapi untuk patologi yang diidentifikasi.

Metodologi penelitian

Diagnostik PCR tuberkulosis akan membutuhkan pengumpulan bahan awal. Cairan biologis berikut ini cocok:

  • darah;
  • urin;
  • tinja;
  • sputum;
  • menggores organ apa pun;
  • cairan kelamin;
  • cairan serebrospinal.

Pada saat yang sama, keakuratan hasil yang diperoleh akan tergantung pada bahan yang diambil untuk penelitian. Paling sering, tes semacam itu untuk tuberkulosis melibatkan pengambilan darah, urin atau dahak dari seorang pasien. Dalam hal ini, hasil yang paling dapat diandalkan dapat diperoleh dalam kasus di mana bahannya dahak.

Faktanya adalah bahwa dalam media biologis seperti itu, infeksi jenis ini muncul baik dalam sepsis atau diseminata tuberkulosis. Dengan bentuk lokal yang terjadi jauh lebih sering dalam analisis darah dan urin, mungkin tidak ada perubahan sama sekali.

Bagaimana diagnosis PCR itu sendiri

Untuk melakukan metode penelitian semacam itu, Anda harus terlebih dahulu mengambil satu atau bahan lain. Setelah itu, dia masuk ke ruangan khusus yang disebut amplificator. Dinamakan demikian dengan alasan bahwa di sinilah rantai DNA digandakan, memungkinkan hasil positif atau negatif lebih lanjut.

Perangkat modern tidak hanya melakukan reaksi berantai polimerase, tetapi juga memberikan hasil survei. Di masa depan, dekripsi mereka dilakukan oleh dokter TB. Pasien harus datang ke spesialis ini dengan ekstrak, yang menunjukkan hasil penelitian.

Dalam hal ini, dokter menggunakan sistem evaluasi berikut:

  • kurang dari 0,9 unit relatif menunjukkan hasil negatif;
  • dari 0,9 hingga 1,1 unit relatif menunjukkan hasil yang meragukan;
  • lebih dari 1,1 unit relatif menunjukkan hasil positif dari penelitian, yaitu adanya tuberkulosis.

Akibatnya, dokter dapat dengan mudah menentukan ada tidaknya agen penyebab penyakit dalam bahan tes.

Siapa yang harus dihubungi untuk analisis?

Saat ini, ada beberapa ahli yang dapat meresepkan versi serupa dari penelitian.

Yang utama adalah dokter berikut:

Terlepas dari kenyataan bahwa masing-masing spesialis dapat meresepkan PCR untuk diagnosis tuberkulosis, hanya dokter TB yang dapat menilai hasil analisis tersebut dan menetapkan diagnosis akhir.

Selain itu, ia akan meresepkan perawatan yang diperlukan, menentukan dengan tepat di mana dia harus pergi (di rumah atau di rumah sakit khusus), dan juga menyediakan pasien dengan semua rekomendasi yang diperlukan untuk perubahan gaya hidup.

Keuntungan dan kerugian dari teknik ini

Analisis PCR untuk tuberkulosis memiliki sejumlah keunggulan yang menarik baik pasien maupun spesialis. Yang utama adalah sebagai berikut:

  1. Analisis ini memberikan hampir 100% deteksi agen penyebab penyakit dalam materi biologis yang dikumpulkan. Agar perangkat menghasilkan hasil positif, cukup hanya memiliki 10-100 sel Mycobacterium tuberculosis.
  2. Hasil setelah tes darah atau sputum telah dilakukan akan siap setelah 4-5 jam. Metode lain untuk menentukan keberadaan Mycobacterium tuberculosis dalam media biologis mungkin memerlukan menunggu dari beberapa minggu hingga 1 bulan.
  3. Risiko rendah hasil salah. Hal ini disebabkan spesifisitas DNA yang agak tinggi yang dimiliki oleh agen penyebab tuberkulosis.
  4. Adalah mungkin untuk mendeteksi DNA mycobacterium pada tuberculosis paru. Dengan bantuan metode penelitian laboratorium lainnya untuk mencapai hasil seperti itu hampir tidak mungkin.

Keuntungan besar lain yang menyediakan proses diagnostik semacam itu adalah kemampuan untuk menentukan resistensi bakteri terhadap satu atau antibiotik lain. Akibatnya, analisis serupa darah atau dahak memungkinkan Anda untuk menentukan obat mana yang paling sensitif terhadap Mycobacterium tuberculosis.

Ulasan pembaca kami - Anastasia Makarova

Baru-baru ini, saya membaca artikel tentang koleksi Biara Bapa George untuk perawatan dan pencegahan tuberkulosis. Dengan koleksi ini Anda tidak bisa hanya SELAMAN menyembuhkan tuberkulosis, tetapi juga mengembalikan paru-paru di rumah.

Saya tidak terbiasa mempercayai informasi apa pun, tetapi saya memutuskan untuk memeriksa dan memesan kemasan. Saya perhatikan perubahan seminggu kemudian: Saya merasakan gelombang kekuatan dan energi, nafsu makan saya membaik, batuk dan sesak napas saya mundur, dan setelah 2 minggu mereka menghilang sama sekali. Analisis saya kembali normal. Cobalah dan Anda, dan jika ada yang tertarik, maka tautan ke artikel di bawah.

Pada saat yang sama, opsi penelitian ini memungkinkan untuk menetapkan stabilitas seperti itu hanya selama 2 hari. Pilihan survei lainnya tidak menyediakan fitur yang sama. Istilah untuk membangun kerentanan terhadap obat antibakteri tertentu, jika tes darah normal diambil, bisa mencapai 1 bulan.

Siapa yang ditahan?

PCR tuberkulosis juga baik karena dapat dilakukan pada kelompok pasien berikut:

  • Pada anak-anak;
  • Pada pasien dengan imunodefisiensi.

Diagnosis tuberkulosis pada anak-anak yang menggunakan metode penelitian ini cukup sering digunakan. Dalam kasus ini, jauh lebih sering untuk tujuan-tujuan ini bahwa tes-tes darah dilakukan, bukan dari sputum. Hal ini disebabkan oleh fakta bahwa tidak selalu anak, terutama yang kecil, dapat tepat mengikuti instruksi dari spesialis untuk mendapatkan cukup dahak dari sistem pernapasan.

Jika ada kebutuhan mendesak untuk bronkoskopi untuk mendapatkan bahan biologis seperti itu. Seorang anak, serta orang dewasa, menderita dari varian penelitian yang sangat sulit, oleh karena itu hanya dilakukan dalam kasus luar biasa.

Hal ini disebabkan oleh fakta bahwa mereka telah secara signifikan mengurangi tingkat keparahan respon imun terhadap infeksi. Darah pasien seperti itu mengandung jumlah antibodi yang relatif sedikit. Selain itu, anak-anak dengan kekebalan lemah tidak dianjurkan untuk melakukan survei menggunakan reaksi Mantoux. Diagnostik PCR untuk mereka adalah cara terbaik untuk keluar dari situasi yang sulit.

Kerugian utama

Selain keuntungan yang tidak diragukan, metode penelitian ini memiliki kekurangannya. Yang utama adalah sebagai berikut:

  • jika darah tidak mengandung DNA mycobacterium tuberculosis, maka ini sama sekali tidak menunjukkan tidak adanya penyakit;
  • dalam kasus bentuk tuberkulosis lokal, biasanya tidak mungkin untuk menetapkan keberadaan DNA di setiap media biologis menggunakan reaksi berantai polimerase;
  • Pada tahap awal penyakit, DNA mycobacterium tuberculosis di berbagai media biologis biasanya tidak ada.

Akibatnya, penelitian ini mungkin berlaku untuk orang dengan imunodefisiensi atau dalam kasus dengan pasien yang berada dalam kondisi serius.

Selain itu, reaksi rantai polimerase yang sangat berharga menjadi diagnosis tuberkulosis paru untuk anak-anak yang kontraindikasi pada metode diagnostik lainnya.

Dalam kasus lain, perilakunya harus dilengkapi dengan metode lain.

Beri tahu kami tentang itu - beri peringkatUnduh...